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細胞培養的注意事項

[2017/3/13]

養好細胞注意點

(一)冷凍管應如何解凍 

取出冷凍管后,須立即放入37 ℃ 水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管的爆裂。

(二)細胞冷凍管解凍培養時,DMSO如何處理

在細胞解凍之后,可直接離心去除DMSO,用新鮮的培養基懸浮后直接放入含有 新鮮培養基的培養角瓶中進行細胞培養,如此可避免解凍后細胞生長受到DMSO影響。

(三)可否使用與原先培養條件不同的培養基

每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基,若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活,不應該馬上替換。

(四)可否使用與原先培養條件不同的血清種類

 血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

(五)何謂 FBS,FCS,CS,HS

FBS (fetal bovine serum) 和 FCS (fetal calf serum) 是相同的意思,兩者都是指胎牛血清。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。

(六)培養細胞時應使用 5% 或 10% CO2

一般培養基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為 pH 的緩沖系統,而培養基中 NaHCO3 的含量將決定細胞培養時應使用的 CO2 濃度。理論當培養基中 NaHCO3 含量為每公升 3.7 g 時,細胞培養時應使用 10% CO2;當培養基中 NaHCO3 為每公升 1.5 g 時,則應使用 5% CO2 培養細胞。


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