對于貼壁細胞：可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培養細胞，然后到預定時間時進行固定等后續操作。也可以用潔凈的蓋玻片，70%乙醇中浸泡后，用無菌的鑷子放置到6孔板內，然后用無菌的生理鹽水、PBS或培養液洗去殘留的乙醇。這時就可以種入細胞進行培養，待細胞貼在蓋玻片上生長良好后，即可進行固定等后續操作。 

　　對于懸浮細胞：把細胞先在固定液中固定，然后把細胞滴加在載玻片上，干燥后細胞會緊貼在載玻片上。然后就可以進行后續操作。如果細胞的粘附能力不佳，可以在載玻片上用PDL等物質進行處理，以增強載玻片的粘附能力。  

　　對于冷凍切片：切片放置在載玻片上后，可以直接進行固定等后續操作。

　　對于石蠟切片：脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟5分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟3次。無水乙醇5分鐘，兩次。90%乙醇5分鐘，兩 次，70％乙醇5分鐘，一次。蒸餾水5分鐘，兩次。
　　抗原修復：根據不同的抗原和抗體，可以選擇把切片放置在如下抗原修復液中，10mM檸檬酸鈉，pH6.0，或1mM EDTA，pH8.0，或10mM Tris, pH10.0，95℃加熱12分鐘，大約在30分鐘內緩慢冷卻至室溫。