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提高轉染實驗效率的注意事項
[2014/1/7]
關于轉染體系的關鍵組分對細胞轉染實驗的效率有何影響,給予您一些關于如何使它們更有利于您研究方面的提示,DNA轉染如何提高轉染實驗成功率。
成功轉染第一步,細胞培養注意事項。有時需要根據細胞系來選擇合適的轉染方法;而有時一些啟動子在不同的細胞系中表現的功能也不同。這些都是設計實驗時需要考慮的因素,姑且不論。不過因為受限于特定的細胞,如何選擇合適的轉染方法就值得考究了。
成功轉染第二步,質粒的因素。啟動子的選擇對于轉染基因的有效表達是非常重要的。對于轉染過程本身雖然無甚影響,但是對轉染結果卻有著微妙的影響。
RNA\siRNA\Oligo轉染注意事項:轉染時的細胞匯合度常常會比DNA轉染高一點,也許是因為RNA轉染表達比DNA快?RNA轉染的用量必須參考轉染試劑說明,因為RNA和轉染試劑的比例決定了轉染復合物的結構和凈電荷,以及是否容易被細胞膜吸附和內吞。RNA少了固然表達不好,太多也會有毒性的問題。
成功轉染第一步,細胞培養注意事項。有時需要根據細胞系來選擇合適的轉染方法;而有時一些啟動子在不同的細胞系中表現的功能也不同。這些都是設計實驗時需要考慮的因素,姑且不論。不過因為受限于特定的細胞,如何選擇合適的轉染方法就值得考究了。
成功轉染第二步,質粒的因素。啟動子的選擇對于轉染基因的有效表達是非常重要的。對于轉染過程本身雖然無甚影響,但是對轉染結果卻有著微妙的影響。
RNA\siRNA\Oligo轉染注意事項:轉染時的細胞匯合度常常會比DNA轉染高一點,也許是因為RNA轉染表達比DNA快?RNA轉染的用量必須參考轉染試劑說明,因為RNA和轉染試劑的比例決定了轉染復合物的結構和凈電荷,以及是否容易被細胞膜吸附和內吞。RNA少了固然表達不好,太多也會有毒性的問題。
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