正確的微生物學檢驗始自正確的標本采取。微生物學檢驗的標準化首先應從標本采取與處理的規范化開始。正確的采取、處理與運送細菌培養標本是臨床細菌檢驗成功的關鍵。

　　一、血液細菌培養

　　臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血流感染的患者，需做血液細菌培養以明確病原。及時、準確地從患者血液中分離出病原菌，才能進行有效的抗菌治療，提高治愈率和降低醫療費用。

　　1、采血時機：應在用抗菌素治療前，最好在患者發冷發熱前半小時采血為宜。

　　2、采血次數與間隔

　　(1)急性感染患者：從兩臂分別采2份血樣。

　　(2)感染性心內膜炎患者：24h內采血3次，每次間隔不少于30分鐘。

　　(3)發熱原因不明患者：24~48h后可再采血2次,間隔不少于60分鐘。

　　3、采血部位：多次采血時，應在不同部位進行。

　　4、采血量：成年人采血量為10ml，新生兒與嬰幼兒為1~2ml。每增加1ml血量平均提高陽性率3.2%。

　　5、抗凝劑：0.025~0.05%聚茴香腦磺酸鈉(sodium polyanethol sulfonate，SPS)。SPS具有抗凝抗吞噬抗補體及拮抗某些抗生素的作用。

　　6、培養條件：視患者的感染、用藥情況選用不同的培養瓶。

　　二、胸腹水及腦脊液標本

　　1、采集：以無菌手續穿刺抽取，為防止凝固可直接注入培養瓶內。

　　2、運送：用帶蓋的無菌容器送檢。

　　3、培養：接種前應離心或做增菌培養。

　　三、尿液標本

　　1、標本采集：應在用藥前或停藥5天后留取標本，并使尿液在膀胱內停留6-8h以上(給細菌足夠的繁殖時間)。

　　(1)清潔排尿法：沖洗尿道口后用無菌容器留取中段尿送檢。

　　(2)膀胱穿刺法：此法是收集尿液的最好方法，尤其對厭氧菌檢查。

　　(3)腎盂尿采集法：應請泌尿科醫生采取，左右側的標本要標記明確。

　　(4)留置導管取尿法：應穿刺導尿管壁抽取尿液。

　　結核分枝桿菌的檢查，應留取24小時尿;檢測衣原體時，尿液標本不能代替尿(陰)道分泌物;巨細胞病毒的檢測，需多次檢測標本，因其釋放是周期性的。

　　2、標本的運送和保存：用無菌帶螺帽的容器盛標本，標本應在1小時內送檢。

　　四、痰標本：標本留取質量的好壞直接影響到對下呼吸道病原學的診斷，導致抗菌治療失敗,以及造成耐藥菌的出現。

　　1、標本采集：應在用藥前或停藥1天后留取標本。

　　(1)自然咳痰：要求患者留痰前用清水漱口3次，用力咳出。首先用滅菌生理鹽水將痰液洗3次，然后將痰塊打碎，制成懸液后再接種。

　　(2)氣管穿刺法：適用于昏迷患者。

　　(3)纖維支氣管鏡抽取法：適用于纖維支氣管鏡檢查或治療的患者。

　　(4)胃液抽取法：適用于嬰幼兒患者。

　　五、咽拭子

　　1、拭子的選擇：要求無菌、不含抑制劑;

　　2、預先沾濕拭子;

　　3、直取感染部位，減少污染。

　　六、生殖道標本

　　1、男性患者：

　　(1)尿道標本：清洗龜頭,用碘伏等消毒后,擠出分泌物或以專用細拭子插入尿道口旋轉采取分泌物送檢。

　　(2)前列腺標本：應由醫師按摩前列腺,以無菌手續自尿道口采取前列腺液送檢。

　　2、女性患者：(1)成年患者：應在擴陰器的支持下，以無菌棉拭子取分泌物送檢。

　　(2)未成年患者：不應使用擴陰器，應以無菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。

　　七、厭氧菌檢查

　　厭氧菌是人體許多部位(如皮膚、口咽部、腸道和泌尿生殖道)正常菌群中的一部分，因此下列材料無需做厭氧菌培養：(1)咽、鼻、尿道或直腸拭子。(2)咳出的痰，通過支氣管鏡取的分泌物，排出或導出的尿、糞及胃內容物。

　　1、正確地選擇標本：為排除或盡量減少正常菌群中厭氧菌的污染，用注射器抽取標本比用拭子更好，特別適用于下列臨床情況：

　　(1)從未開放的膿腫抽取膿液。

　　(2)通過胸腔穿刺抽出的胸腔液。

　　(3)從恥骨聯合上方做膀胱穿刺吸出或從腎造口管收集的尿。

　　(4)氣管切開吸取的肺分泌物。

　　(5)穿刺抽出的腹腔液。

　　(6)通過腰椎穿刺抽出的腦脊液。

　　(7)竇道標本可插入小導管用注射器吸出，注射器和針頭內的氣體應全部排出，將其內容物直接注入一個已排出氣的無菌試管內。也可自竇道損傷部位取材做活組織檢查。如果必須使用拭子，應盡快接種于適宜的培養基中。

　　2、正確地運送厭氧菌標本：臨床標本一旦離開人體部位，在進入厭氧環境前，必須防止大氣中氧的毒性作用。應及時將取材的拭子、塑料導管內的少量液體、吸入注射器的標本裝入厭氧生物袋或管，在運送過程中要保持厭氧狀態。培養基內不應含有肝素，因它會抑制細菌生長。

　　八、腦膜炎奈瑟菌的檢查

　　根據病期不同，采集的標本也有所不同。菌血癥期病人可采取血液;出現出血點或瘀斑者，可挑取瘀斑滲出液;如出現腦脊髓膜刺激癥狀者，必要時可抽取腦脊液;上呼吸道感染期的疑似病人和帶菌者，可取鼻咽腔分泌物進行檢查。因該菌易自溶，故應立即送檢，最好在床邊接種。

　　九、支原體及衣原體檢查

　　支原體和衣原體主要在人的泌尿生殖道的上皮細胞內生長，應該以專用棉拭子采取標本。尿標本應離心取沉淀。

　　十、糞便標本

　　1、標本采集：應在發病早期并且盡量在用抗生素治療前采集，稀便不少于1ml，固體便不少于1克，無便患者可用直腸拭子采集標本。

　　2、顯微鏡檢查：糞便直接涂片革蘭染色，可作為艱難梭菌、弧菌、彎曲菌、葡萄球菌、念珠菌等的初步篩查，更能作為菌群失調的直觀判斷。