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氣相色譜法分析羊脂油的脂肪酸成分
[2013/1/24]
脂肪酸(fatty acid),是指一端含有一個羧基的長的脂肪族碳氫鏈,是有機物,直鏈飽和脂肪酸的通式是C(n)H(2n 1)COOH,低級的脂肪酸是無色液體,有刺激性氣味,高級的脂肪酸是蠟狀固體,無可明顯嗅到的氣味。
羊脂油來源于?苿游锷窖駽aprahircusLinnaeus或綿羊OvisariesLinnaeus的脂肪油,甘、溫,具有補虛、潤燥、祛風、解毒的功效,主要治療虛勞羸瘦、久痢、口干便秘、肌膚皸裂等癥[1]。用本品炮制藥材能夠達到“增效”的目的,如羊脂油炙淫羊藿,可以增強淫羊藿的溫腎助陽作用[2]。
羊脂油作為常用炮制輔料,尚未制訂其藥用質量標準,僅在食品標準中對其外觀形狀等制訂了一些理化指標限度要求。為了規范羊脂油的使用,本研究首次采用氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)技術對其脂肪酸類成分進行分析,以期對其質量標準研究提供實驗數據[2]。
1儀器與材料
GC-MS氣質聯用色譜儀,FID檢測器。
色譜條件:HP-5(0.25μm×30m,0.25mm)毛細管柱;程序升溫,初始溫度100℃,保持5min,以8℃/min升至180℃,再以28℃/min升至230℃;進樣口溫度250℃;載氣N2;檢測器溫度250℃;分流比為20∶1;進樣量0.1μl。
質譜條件:離子源為EI;電子能量70eV;離子源溫度200℃;接口溫度250℃;溶劑切割4min;掃描質量范圍m/z35~688;掃描周期0.6s/dec,用NIST標準質譜庫檢索。
羊脂油經本文作者鑒定為?苿游锞d羊Ovisarieslinnaeus的脂肪油。
2方法與結果
2.1樣品制備取羊脂油樣品200g切成小塊,于120℃煉制,待出油量不再增加,去渣取油,備用。
2.2供試品溶液制備取0.4g羊油樣品,置于50ml錐形瓶,加入15ml0.5mol/L的KOH-MeOH溶液,于60℃水浴20~30min,至黃色油珠完全消失為止,冷卻后,再加10ml14%的三氟化硼乙醚溶液,水浴5min,取出冷卻后,加入10ml正己烷和10ml氯化鈉飽和溶液,振搖,取上層溶液備用。
2.3樣品測定對羊脂油樣品的總離子流色譜圖通過NIST標準質譜庫進行檢索,并結合相關資料進行人工解析,確認了18種成分,歸一化法計算出各峰面積的相對百分含量。見表1。表1羊脂油的脂肪酸類成分組成
3討論
羊脂油所含長鏈脂肪酸甘油酯[1]具有很高的沸點,如果直接進行分析,高溫下脂肪酸甘油酯易分解;并且在色譜柱上如果要使各組分能夠按脂肪酸的不飽和度分離,應使用極性固定相,而該類固定相的耐溫性較差,從而限制了這種方法的應用。因此一般都要進行前處理,即脂肪酸衍生化,將脂肪酸甲酯化或乙酯化,一般選擇甲酯化的方法,并以三氟化硼-甲醇法最為常用[3]。
本實驗以120℃煉制的羊脂油為樣品,采用三氟化硼-甲醇法對樣品進行甲酯化處理,其產物經GC-MS分析,取得滿意的分離效果,經NIST譜圖庫檢索,從中檢出16種脂肪酸成分,占總氣相色譜峰面積的94.61%。通過與標準譜圖對照,分析,確定每一個成分的化學結構,按峰面積百分比法進行定量分析,分別求得各組成化合物的相對含量見表1,結果顯示羊脂油所含不飽和脂肪酸有9種,包括油酸(34.45%)、反式9-十八碳烯酸(10.16%)、Z-11-十八碳烯酸甲酯(3.30%)、棕櫚油酸(2.03%)、7,10-十八碳二烯酸酸(1.69%)、亞油酸(1.37%)、2-己基環丙烷酸(1.09%)、10-十九烯酸(0.24%)、Z-11-十四碳烯酸甲酯(0.15%);飽和脂肪酸有7種,包括棕櫚酸(21.59%)、硬脂酸(13.49%)、肉豆蔻酸(2.15%)、十七烷酸(1.34%)、十五烷酸(0.60%)、14-甲基棕櫚酸(0.60%)、15-甲基棕櫚酸(0.36%)。本實驗結果與文獻報道[1]相符,并進一步增加了成分的組成。
實驗結果顯示,羊脂油中油酸和棕櫚酸的含量最高,二者的含量已經超過總脂肪酸量的50%,均具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、抗血小板聚集以及抗血栓形成等作用,此外亞油酸是人體必需的脂肪酸,具有防止血栓形成、軟化血管、調節脂肪代謝,降低血中膽固醇的作用。
本實驗對羊脂油的成分進行了初步研究,為該炮制輔料其真偽優劣的質量評價提供了切實可行的分析方法,為其質量標準的制定提供了實驗數據。各地羊脂油的氣相色譜分析結果將另文發表,其對所炮制飲片藥理作用的影響正在進一步研究中。
羊脂油來源于?苿游锷窖駽aprahircusLinnaeus或綿羊OvisariesLinnaeus的脂肪油,甘、溫,具有補虛、潤燥、祛風、解毒的功效,主要治療虛勞羸瘦、久痢、口干便秘、肌膚皸裂等癥[1]。用本品炮制藥材能夠達到“增效”的目的,如羊脂油炙淫羊藿,可以增強淫羊藿的溫腎助陽作用[2]。
羊脂油作為常用炮制輔料,尚未制訂其藥用質量標準,僅在食品標準中對其外觀形狀等制訂了一些理化指標限度要求。為了規范羊脂油的使用,本研究首次采用氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)技術對其脂肪酸類成分進行分析,以期對其質量標準研究提供實驗數據[2]。
1儀器與材料
GC-MS氣質聯用色譜儀,FID檢測器。
色譜條件:HP-5(0.25μm×30m,0.25mm)毛細管柱;程序升溫,初始溫度100℃,保持5min,以8℃/min升至180℃,再以28℃/min升至230℃;進樣口溫度250℃;載氣N2;檢測器溫度250℃;分流比為20∶1;進樣量0.1μl。
質譜條件:離子源為EI;電子能量70eV;離子源溫度200℃;接口溫度250℃;溶劑切割4min;掃描質量范圍m/z35~688;掃描周期0.6s/dec,用NIST標準質譜庫檢索。
羊脂油經本文作者鑒定為?苿游锞d羊Ovisarieslinnaeus的脂肪油。
2方法與結果
2.1樣品制備取羊脂油樣品200g切成小塊,于120℃煉制,待出油量不再增加,去渣取油,備用。
2.2供試品溶液制備取0.4g羊油樣品,置于50ml錐形瓶,加入15ml0.5mol/L的KOH-MeOH溶液,于60℃水浴20~30min,至黃色油珠完全消失為止,冷卻后,再加10ml14%的三氟化硼乙醚溶液,水浴5min,取出冷卻后,加入10ml正己烷和10ml氯化鈉飽和溶液,振搖,取上層溶液備用。
2.3樣品測定對羊脂油樣品的總離子流色譜圖通過NIST標準質譜庫進行檢索,并結合相關資料進行人工解析,確認了18種成分,歸一化法計算出各峰面積的相對百分含量。見表1。表1羊脂油的脂肪酸類成分組成
3討論
羊脂油所含長鏈脂肪酸甘油酯[1]具有很高的沸點,如果直接進行分析,高溫下脂肪酸甘油酯易分解;并且在色譜柱上如果要使各組分能夠按脂肪酸的不飽和度分離,應使用極性固定相,而該類固定相的耐溫性較差,從而限制了這種方法的應用。因此一般都要進行前處理,即脂肪酸衍生化,將脂肪酸甲酯化或乙酯化,一般選擇甲酯化的方法,并以三氟化硼-甲醇法最為常用[3]。
本實驗以120℃煉制的羊脂油為樣品,采用三氟化硼-甲醇法對樣品進行甲酯化處理,其產物經GC-MS分析,取得滿意的分離效果,經NIST譜圖庫檢索,從中檢出16種脂肪酸成分,占總氣相色譜峰面積的94.61%。通過與標準譜圖對照,分析,確定每一個成分的化學結構,按峰面積百分比法進行定量分析,分別求得各組成化合物的相對含量見表1,結果顯示羊脂油所含不飽和脂肪酸有9種,包括油酸(34.45%)、反式9-十八碳烯酸(10.16%)、Z-11-十八碳烯酸甲酯(3.30%)、棕櫚油酸(2.03%)、7,10-十八碳二烯酸酸(1.69%)、亞油酸(1.37%)、2-己基環丙烷酸(1.09%)、10-十九烯酸(0.24%)、Z-11-十四碳烯酸甲酯(0.15%);飽和脂肪酸有7種,包括棕櫚酸(21.59%)、硬脂酸(13.49%)、肉豆蔻酸(2.15%)、十七烷酸(1.34%)、十五烷酸(0.60%)、14-甲基棕櫚酸(0.60%)、15-甲基棕櫚酸(0.36%)。本實驗結果與文獻報道[1]相符,并進一步增加了成分的組成。
實驗結果顯示,羊脂油中油酸和棕櫚酸的含量最高,二者的含量已經超過總脂肪酸量的50%,均具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、抗血小板聚集以及抗血栓形成等作用,此外亞油酸是人體必需的脂肪酸,具有防止血栓形成、軟化血管、調節脂肪代謝,降低血中膽固醇的作用。
本實驗對羊脂油的成分進行了初步研究,為該炮制輔料其真偽優劣的質量評價提供了切實可行的分析方法,為其質量標準的制定提供了實驗數據。各地羊脂油的氣相色譜分析結果將另文發表,其對所炮制飲片藥理作用的影響正在進一步研究中。
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