高壓蒸汽滅菌的時間計算，應從滅菌器柜室內達到要求溫度時算起，至滅菌完成為止。總時間包括：熱力穿透時間，即從消毒柜內達到滅菌溫度至消毒物品中心部位亦達到滅菌溫度所需時間。時間的長短取決于消毒物品的性質、包裝的大小,放置位置和高壓鍋內空氣排空程度和滅菌器的種類。消毒維持時間，即殺滅微生物所需的時間，一般用殺滅脂肪嗜熱桿菌芽胞所需時間來表示。在115℃時需30分鐘，121℃時需12分鐘，132℃時需2分鐘。安全時間，一般為維持時間的一半，其長短視消毒物品而定。對易導熱的金屬器材的滅菌，不需要安全時間。

　　一般下排氣式高壓滅菌器所需時間為：115℃30分鐘，121℃15分鐘，126℃10分鐘。115℃常用于制藥工業上的滅菌。在微生物實驗室內，有些含糖培養基亦用115℃30分鐘滅菌，因為在更高溫度下糖會分解。121℃～126℃常用于醫療衛生和防疫工作中的滅菌。以上所述知識滅菌時間的概數，1次滅菌中具體使用多少時間，需要根據物品的種類、包裝的大小、安放情況和滅菌器的性能來確定。下表提供的數據可供實際工作中參考。

　　物 品 種 類滅 菌 時 間(分鐘)

　　121℃126℃

　　手術用品*

　　器械包1510

　　橡膠手套2520

　　敷料包3020

　　敷料鼓4530

　　封閉的瓶裝液體**

　　500ml2015

　　1,000ml2520

　　2,000ml4035

　　5,000ml5045

　　無蓋鐵桶的微生物實驗室廢物

　　大小18×28×36cm34035

　　直徑28cm、高25cm6055

　　大小36×22×22cm3>100>100

　　* 包裝體積 < 30×30×30cm3

　　** 對于粘性液體，如瓊脂培養基等，應延長時間5～10分鐘。