【關鍵詞】紫外分光

　　【摘要】目的測定板藍根滴眼液的含量。方法紫外分光光度法，檢測波長290nm。結果靛玉紅吸收度與濃度呈良好的線性關系。r=0.9994，回收率為100.1%，管RSD<0.832。結論本法簡便，準確。

　　關鍵詞 靛玉紅板藍根 滴眼液 紫外分光光度法

　　【Abstract】ObjectiveTodeterminethecontentofBanlangenDiyanye.MethodsTheDingyuhongweredeterminedbyspectrophotometryatwavelenth290nm.ResultsTheaveragerecoveryrateofwas100.1%(RSD<0.83，r=0.9994).ConclusionThemethodwassimpleandaccurate.

　　KeywordsUVBanlangenDiyanyeUV

　　板藍根作為清熱解毒藥在臨床上應用頻率甚高，其中以板藍根沖劑、板藍根注射劑為我們所熟知。多用于呼吸道感染、流行性腮腺炎、流行性乙型腦炎、流行性感冒、傳染性肝炎、紅眼病等。本文以板藍根為原藥材，利用其抗菌、抗病毒以及清熱解毒之功效，與有潤滑作用的“人工淚液”相結合，研制了用于眼部消炎、防止眼部干澀的板藍根滴眼液。

　　通過板藍根的化學成分及藥理活性研究表明，靛玉紅是其有效成分之一，具有廣譜抗菌作用以及抗病毒、抗內毒素作用，同時，靛玉紅還能夠抗癌，增強機體的免疫力。為保證臨床使用的板藍根制劑的質量，通常選用靛玉紅、靛藍作為板藍根的質量控制標準。我們選擇靛玉紅作為標準品，測定板藍根的含量。

　　1儀器與藥品

　　紫外分光光度計(貝克曼公司)，靛玉紅(中國藥品生物制品檢定所)，板藍根滴眼液(自制)，其它試劑均為分析純。

　　2方法及結果

　　2.1檢測波長的選擇通過對靛玉紅標準品的紫外掃描，從圖1可見靛玉紅在290nm處有顯著吸收峰，板藍根提取物在290nm附近有吸收。因此選定290nm為檢測波長。

　　圖1靛玉紅的紫外掃描圖譜(略)

　　2.2標準曲線的建立精確稱取靛玉紅標準品10mg，置100ml容量瓶中加氯仿溶解，稀釋至刻度，精密吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml分別至10ml容量瓶中，加氯仿稀釋至刻度。用紫外分光光度計，以氯仿為空白波長測定吸光度。經回歸處理得線性回歸方程為:A=1.1603x-0.0008，(n=6)，r=0.9994。可見該方法在1.03～6.18μg/ml范圍內有良好的線性關系。

　　2.3精密度配制不同濃度靛玉紅標準液，以氯仿為空白，同標準曲線項下操作，測定結果并計算密度。于1日內連續測定5次不同濃度樣品，并計算日內相對標準偏差，結果見表1。以上樣品連續測定5天并計算日間相對標準偏差，試驗結果見表1。使用該方法，日內、日間精密度良好。

　　表1靛玉紅的日內、日間精密度(略)

　　2.4回收率的考察精密量取樣品適量，加入靛玉紅標準液，以氯仿為空白，同標準曲線項下操作，測定結果并計算回收率。結果見表2。

　　表2靛玉紅的回收率(略)

　　從以上回收率，日內、日間精密度的測定結果可以看出，采用本法系統穩定、靈敏度高、專屬性強、重現性和準確性均良好，且操作簡便，因此適合用于板藍根滴眼液中靛玉紅的含量測定。

　　2.5樣品的測定

　　2.5.1萃取時間的選擇同一批樣品精密量取2.5ml至分液漏斗，加入5ml氯仿，振搖并計時。當振搖10min時，取出氯仿層溶液適量，以氯仿為空白，于290nm處測定吸光度;倒回分液漏斗繼續振搖，并分別在20min、30min重復操作。結果見表3。

　　表3振搖時間對萃取的影響(略)

　　結果表明，延長振搖時間并未使萃取量有顯著的增加。因此，每次萃取時，振搖10min即可。

　　2.5.2萃取量選擇同一批樣品精密量取2.5ml至分液漏斗，加入5ml氯仿，振搖10min后，將氯仿層全部分離出來，以氯仿為空白，在290nm處測定吸光度。重復上述操作5次，累計加入25ml氯仿。結果見表4。

　　表4不同提取次數對測定的影響(略)

　　將所測A值帶入標準曲線方程，所得濃度即為第n次萃取后，萃取液氯仿中的相當于靛玉紅的濃度。將濃度累計，即得n次萃取后，氯仿中相當于靛玉紅的濃度，也就是樣品相當于靛玉紅的濃度。計算結果見表5。

　　表5不同提取容積對測定的影響(略)

　　從試驗結果和計算結果表明，第四、五次萃取后濃度已無明顯變化，因此，萃取2.5ml樣品，用20ml氯仿即可。

　　2.5.3萃取次數的選擇精密量取2.5ml樣品3份，分別20ml氯仿以不同次數對其進行萃取:第一組20ml萃取1次;第二組先后以10ml萃取2次;第三組先以5ml、5ml，10ml萃取3次;第四組分別以5ml萃取4次。分別測定吸光度并計算濃度，操作步驟與計算方法同上。結果見表6。

　　表6不同萃取次數對測定的影響(略)

　　由于萃取3次與萃取4次濃度變化不大，且4次萃取時的4次溶液開始乳化，因此，只需將20ml氯仿分3次萃取即可。

　　2.5.4重現性實驗同一組樣品測定5次，操作同上。結果見表7。

　　表7重現性實驗結果(略)

　　從結果可知，該萃取方法重現性較好，操作簡便易行。

　　2.5.5含量測定方法:精密吸取板藍根滴眼液2.5ml于分液漏斗中，再精密吸取5ml氯仿加入其中，振搖10min，分離氯仿層，以氯仿為空白，再290nm處測定吸光度;再依次精密吸取5ml、10ml氯仿萃取2次，操作同上。將吸光度值帶入標準曲線方程進行計算，方法同上。

　　測定五批樣品，計算結果見表8。

　　表8不同批號的含量測定結果(略)

　　該含量測定方法重現性較好，且操作簡單易行;通過對五批樣品的測定，可確定該板藍根滴眼液的含量相當于靛玉紅濃度的0.720～0.750μg/ml。

　　3討論

　　本文通過對板藍根提取液的紫外掃描，確認了板藍根的有效成分為靛玉紅，并建立了以靛玉紅為質量標準的紫外分光光度法作為板藍根滴眼液的含量測定方法。通過回收率試驗以及日內差、日間差試驗，證明該方法靈敏度高，專屬性強，重現性好，且簡便易行。