無菌室的建設要求

　　1、工作室應矮小、平整，面積只需4米2左右，高2.2—2.3米，內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水之材質，便于擦洗及殺菌;

　　2、室內采光面積大，從室外應能看到室內情況;

　　3、為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小于無菌室;

　　4、無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ，其電源開關均應設在室外;

　　5、無菌室與緩沖間進出口應設拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。

　　無菌室的使用與管理

　　1、無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻璃鉛筆等，不要放與檢測無關的物品;

　　2、室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動;

　　3、每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最后紫外燈殺菌半小時;

　　4、定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個(平板直徑均9厘米)，置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時;測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌`霉菌總數均不得超過10個為;

　　5、無菌室殺菌前，應將所有物品置于操作之部位(待檢物例外)，然后打開紫外燈殺菌30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用;

　　6、進入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋;

　　7、操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。

　　器材及場所的滅菌消毒

　　微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法。

　　1、高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內，一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理;

　　2、火焰滅菌： 接種針、接種環等可直接火焰滅菌;

　　3、高溫干燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃滅菌2小時;

　　4、一 般消毒: 無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌，必須用其他方法進行消毒處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進行消毒;

　　5、空氣的消毒： 開啟紫外燈照射30—60分鐘即可。

　　6、 操作要領：

　　1)準備工作

　　. 先進行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30—60分鐘;

　　. 檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒;

　　. 操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室;

　　. 進入無菌室后再一次消毒手部，然后才進行檢驗操作。

　　2)操作過程注意事項

　　. 動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染;玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境;

　　. 操作應在近火焰區進行;

　　. 接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘干后再灼燒滅菌;

　　. 使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作;

　　. 觀察平板時不好 開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當開縫;

　　. 進行可疑致病菌涂片染色時，應使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌;

　　. 工作結束，收拾好工作臺上的樣品及器材，最后用消毒液擦拭工作臺。